产品内容: 
提取液：液体100mL×1瓶，使用前预冷。 
试剂一：液体15mL×1瓶，避光保存。 
试剂二：液体1.5mL×1瓶，4℃避光保存。 
试剂三：液体1.5mL×1瓶，避光保存。 
混合液（现用现配）：将试剂一、二、三按照10:1:1的比例混合，使用前37度预温。
产品说明: 
测定对象中各种抗氧化物质和抗氧化酶等构成总抗氧化水平。在生物学、医学和药学研究中常 常检测血浆、血清、唾液、尿液等各种体液，细胞或组织等裂解液、植物或中草药抽提液及各种抗 氧化物(antioxidant)溶液的总抗氧化能力。 在酸性环境下，物质还原Fe3+-三吡啶三吖嗪(Fe3+-TPTZ)产生蓝色的Fe2+-TPTZ的能力反映了 其总抗氧化能力。
自备实验用品 可见分光光度计/酶标仪、恒温水浴锅、低温离心机、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。
 
操作步骤:
一、 样品的制备 
(1) 血清、血浆、唾液或尿液样品 血浆（制备时可以使用肝素或柠檬酸钠抗凝，不宜使用EDTA抗凝）4℃，5000rpm 离心10min， 取上清待测。血清、唾液或尿液样品直接用于测定，也可以-80℃冻存（不宜超过30 d）后再测定。 
(2) 组织样品 按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取 液）进行冰浴匀浆，然后10000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 
(3) 细胞样品 按照细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎（功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；10000g，4℃离心 10min， 取上清，置冰上待测。 
 
二、 测定操作 混合液(现配现用)：将试剂一、试剂二、试剂三按 10:1:1 的比例混合，使用前预温至 37℃。
 
对照管
测定管
混合液（μL）
180
180
样本（μL）
 
6
双蒸水（μL）
24
18
充分混匀，反应 10min，双蒸水调零，1mL 玻璃比色皿，测定 593nm 处吸光值， △A= A 测定-A 空白
 
注意：空白管只需测定一次。 
 
三、 总抗氧化能力计算：
 A、用微量石英比色皿计算： 标准曲线为y=0.6308 x +0.1291，R 2 =0.9989 
(1) 按蛋白浓度计算 
总抗氧化能力（U/mg prot）=1/ 0. 6308×（△A-0.1291）× V反总÷（V样× Cpr） =53.9×（△A-0.1291）÷ Cpr 
(2) 按样品质量计算 
总抗氧化能力（U/g）=1/ 0. 6308 ×（△A-0.1291）× V反总÷（V样÷V样总×W） =53.9×（△A-0.1291）÷ W 
(3) 按细胞数量计算 
总抗氧化能力（U/104 cell）= 1/ 0. 6308×（△A-0.1291）×V反总÷V样×V样总÷细胞数量（万个） = 53.9×（△A-0.1291）÷ 细胞数量（万个） 
(4) 按液体体积计算 
总抗氧化能力（U/mL）= 1/ 0. 6308×（△A-0.1291）× V反总÷V样 =53.9×（△A-0.1291） V 样总：加入提取液体积，1 mL； 
V 反总：反应总体积，204μL；V 样：反应中样品体积，6μL； W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL 
 
B、用96孔板计算： 标准曲线为y=0.3154 x +0.1291，R 2 =0.9989 
（1）按蛋白浓度计算 总抗氧化能力（U/mg prot）=1/ 0.3154×（△A-0.1291）× V反总÷（V样× Cpr） =107.8×（△A-0.1291）÷ Cpr 
（2）按样品质量计算 总抗氧化能力（U/g）=1/ 0.3154 ×（△A-0.1291）× V反总÷（V样÷V样总×W） =107.8×（△A-0.1291）÷ W 
（3）按细胞数量计算 总抗氧化能力（U/104 cell）= 1/ 0.3154×（△A-0.1291）×V反总÷V样×V样总÷细胞数量（万个） = 107.8×（△A-0.1291）÷ 细胞数量（万个） （4）按液体体积计算 总抗氧化能力（U/mL）= 1/ 0.3154×（△A-0.1291）× V反总÷V样 = 107.8×（△A-0.1291） 
V 样总：加入提取液体积，1 mL； V 反总：反应总体积，204μL；V 样：反应中样品体积，6μL； W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL 
 
注意事项： 
1. 试剂二对人体有刺激性，请采取适当的防护措施。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴乳胶 手套操作。 
2. 尽量避免使用在酸性条件下呈蓝色或接近蓝色的试剂，否则对本试剂盒的检测结果产生干扰。 
3. 样品中不宜添加Tween、Triton和NP-40等去垢剂和DTT、巯基乙醇等影响氧化还原反应的还原剂。 
4. 如果样品测定出来的吸光值在标准曲线范围以外，需把样品适当稀释或浓缩后再进行测定。 
5. 试剂盒 2-8℃保存。
相关文献：
《A C2H2 zinc-finger protein OsZFP213 interacts with OsMAPK3 to enhance salt tolerance in rice》 作者:Z Zhang, H Liu, C Sun, Q Ma, H Bu, K Chong 期刊:Journal of plant Physiology 影响因子:7.394 PMID:30055519
《Alleviation of reactive oxygen species enhances PUFA accumulation in Schizochytrium sp. through regulating genes involved in lipid metabolism》 作者:Sai Zhang,Yaodong He,Biswarup Sen,Xiaohong Chen,Yunxuan Xie,Jay D.Keasling,Guangyi Wang 期刊:Metabolic Engineering Communications 影响因子: PMID:29896446
《Evaluation of Oxidative Stress Status in Aged Human in relation to some Diseases》 作者:Esmail S. Kakey and Amez A. Ismael 期刊:International Conference on Pure and Applied Sciences 影响因子: PMID:
《Wild Lonicera caerulea berry polyphenol extract reduces cholesterol accumulation and enhances antioxidant capacity in vitro and in vivo》 作者:Suwen Liu,Lu You ,Yuhua Zhao,Xuedong Chang 期刊:Food Research International 影响因子:3.579 PMID:29580541